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ELISA酶联免疫实验易错问题有哪些

更新时间:2025/6/30 9:07:59        阅读:56

一、为什么必须设置复孔?

为获得更准确的实验结果,强烈建议标准品及样本进行复孔检测,因为复孔检测可以:计算平均值,确保实验结果更准确;解决实验中误操作造成的跳孔现象;计算CV值,对实验的操作和试剂盒的精密度进行评估。


二、重复性差怎么办?

1.样品数量不一,加样时间长短不一。

2.酶标仪滤光片不对或输入波长不对。

3.酶标仪测定重复性差。


三、为什么标准曲线线性较差?

需要按照推荐方式保存标准品;溶解标准品之前需短暂离心,收集粉末;确保标准品溶解和混匀,然后再进行后续的系列稀释步骤,确保每一步都充分混匀且移液;显色的恰当终止;选择合适的数学拟合方程绘制标准曲线。


四、为什么所有试剂和检测样本要平衡至室温后再进行加样操作?

温度是ELISA结合反应的重要影响因素。为了使所有样本在一致的温度下反应,实验前务必将所有试剂平衡至室温,包括检测样本。避免因温度的动力学反应差异而导致ELISA检测结果的不准确。


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