欢迎来到常达恩生物科技（上海）有限公司！
咨询电话：18521031688
当前位置：
首页 > 新闻中心 > 石胆酸ELISA试剂盒检测原理石胆酸ELISA试剂盒是一种用于定量检测生物样本（如血清、血浆、尿液、组织匀浆等）中石胆酸浓度的免疫学检测工具。以下是关于该试剂盒的详细信息：
1. 检测原理
ELISA技术：通常基于抗原-抗体特异性结合的原理，采用夹心法或竞争法。
夹心法：固相抗体捕获样本中的LCA，随后通过酶标记的另一抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，通过底物显色反应定量。
竞争法：适用于小分子抗原（如LCA），未标记的LCA与酶标LCA竞争结合抗体，通过抑制显色反应强度来推算浓度。
2. 试剂盒组成
预包被抗LCA单克隆抗体的微孔板
标准品（已知浓度的LCA溶液）
酶标二抗（如辣根过氧化物酶HRP标记的抗LCA抗体）
洗涤缓冲液、显色底物（TMB等）、终止液
封板膜、说明书
3. 适用样本类型
血清、血浆（需抗凝处理）
组织匀浆液
尿液
细胞培养上清
4. 检测范围
不同的灵敏度不同，通常为 0.1–100 ng/mL 或更低，具体需参考说明书。、
5. 应用领域
科研研究：探索LCA在肠道菌群、代谢综合征、炎症性肠病（IBD）中的作用。
药物开发：监测药物对胆汁酸代谢的影响。
6. 实验步骤（简要流程）
样本处理：离心分离血清/血浆，组织匀浆液需匀浆后离心取上清。
标准曲线制备：稀释标准品至梯度浓度。
加样：向孔板中加入标准品、样本及空白对照。
孵育：室温震荡孵育（通常1-2小时），使抗体与LCA结合。
洗涤：去除未结合物质。
加酶标二抗：孵育后再次洗涤。
显色与终止：加入底物显色，用终止液终止反应。
读数：酶标仪测定450 nm波长下的OD值。
数据分析：通过标准曲线计算样本LCA浓度。
7. 注意事项
样本保存：新鲜样本建议4℃短期保存，需-20℃或-80℃冻存（避免反复冻融）。
交叉反应：确保试剂盒特异性，避免与其他胆汁酸（如DCA、CDCA）交叉反应。
质量控制：设置空白孔、阳性/阴性对照，确保实验准确性。
操作规范：严格遵循说明书，避免污染或操作误差。
8. 常见问题
高背景值：可能因洗涤不或样本基质干扰，需优化洗涤步骤。
信号弱：检查抗体活性、样本稀释度或孵育时间。
标准曲线偏差：确保标准品稀释准确，避免污染。
庞经理